Cilindros de clonación de laboratorio: ¿cómo aislar colonias celulares individuales?

Imprescindibles en cultivo celular, los cilindros de clonación permiten aislar una colonia adherente para establecer una línea monoclonal tras una transfección, edición por CRISPR, fusión de hibridomas o selección con antibiótico. Al colocarlos alrededor de un clon, generan una zona estanca que facilita la acción de un agente disociador (tripsina/EDTA) y el traspaso sin contaminación cruzada. Disponibles en vidrio de borosilicato reutilizable o en plástico estéril listo para usar, con distintos diámetros y acabados de borde, aportan seguridad a las etapas críticas y agilizan el flujo de trabajo en el banco de laboratorio.

¿Qué tipos de cilindros de clonación existen?

Un cilindro de clonación (o anillo de clonación) se coloca alrededor de una colonia adherente para aislarla del resto de la monocapa. Una fina capa de grasa de silicona estéril (o una base adhesiva, según el modelo) garantiza la estanqueidad; se añade el reactivo de disociación y, a continuación, se recupera la colonia en suspensión para resembrarla en un pocillo limpio.

Dos familias principales:
• Vidrio de borosilicato: robusto, reutilizable, autoclavable, bordes pulidos o biselados para un asentamiento estable. Excelente resistencia química y visibilidad.
• Plástico estéril (a menudo poliestireno): de un solo uso, listo para usar, reduce las contaminaciones cruzadas y ahorra tiempo. Versiones adhesivas disponibles para evitar la grasa.

Criterios de selección:
• Diámetro interno (normalmente de 3 a 10 mm) acorde al tamaño de la colonia y a la geometría de la caja o placa.
• Altura y acabado del borde (plano o biselado) para optimizar la estanqueidad y el acceso de la pipeta.
• Esterilidad, embalaje (individual, a granel), certificaciones (libre de DNasa/RNasa, no pirogénico).
• Compatibilidad con los agentes de disociación y con superficies tratadas para cultivo celular.
• Impacto ambiental: vidrio reutilizable (menos residuos), plástico estéril para evitar reprocesado y asegurar la trazabilidad.

Tipo	Principio	Aplicaciones
Vidrio de borosilicato	Reutilizable, autoclavable, bordes pulidos	Clonado intensivo, protocolos exigentes, disolventes
Plástico estéril	Uso único, listo para usar	Series rápidas, flujos tipo GMP, cuando hay riesgo de contaminación
Plástico adhesivo	Base adhesiva, sin grasa	Superficies delicadas, ahorro de tiempo, formación

¿En qué ámbitos de aplicación se utiliza un cilindro de clonación?

En las ciencias de la vida y la biotecnología se utiliza para obtener líneas celulares monoclonales estables tras la transfección o la edición del genoma. En el ámbito farmacéutico, se utiliza para la selección de clones productores (hibridomas, células CHO) en la producción de anticuerpos. En la investigación académica y en CRO, acelera la selección de clones CRISPR, el aislamiento de subpoblaciones y la estandarización de ensayos. En virología, ayuda a seleccionar placas aisladas. En cosmética y toxicología, facilita la creación de cultivos homogéneos para ensayos reproducibles. Algunos laboratorios de control de calidad lo emplean para estabilizar líneas celulares de referencia y aumentar la fiabilidad de los bioensayos.

Los distintos cilindros de clonación disponibles

Preguntas frecuentes sobre cilindros de clonación

¿Cómo elijo el diámetro adecuado del cilindro?
Apunte a un diámetro 1–2 mm mayor que la colonia para asegurar un buen sellado y permitir el paso de la punta de pipeta sin cortar la monocapa celular.

¿Vidrio o plástico: qué conviene?
El vidrio es duradero, autoclavable e inerte químicamente. El plástico estéril ahorra tiempo, reduce contaminaciones y es ideal para lotes de un solo uso.

¿Cómo garantizo una buena estanqueidad?
Aplique un anillo fino de grasa de silicona estéril, coloque sin ejercer demasiada presión y expulse las burbujas. Las versiones adhesivas evitan usar grasa en superficies sensibles.

¿Puedo utilizarlos con algo distinto a la tripsina?
Sí. EDTA, Accutase u otras enzimas suaves pueden ser adecuadas según la línea celular. Verifique la compatibilidad con la superficie de cultivo y la cinética de desprendimiento.

¿Cómo esterilizo un cilindro de vidrio?
Limpie, enjuague a fondo y luego autoclave. El vidrio de borosilicato también tolera un paso rápido por la llama. Evite abrasivos que rayen y retengan contaminantes.

¿Los modelos de plástico son reutilizables?
No. Generalmente son de un solo uso y se suministran estériles. La reutilización aumenta el riesgo de contaminación y de deformación durante la limpieza.

¿Hay riesgo para las células con los adhesivos?
Los modelos de calidad emplean adhesivos de baja citotoxicidad. Deje que se adsorban unos segundos y evite el deslizamiento para minimizar el estrés celular.