EURx (clonación) - Equipo de laboratorio

Kit Universal de extracción de ADN genómico

• Método basado en la precipitación en etanol de los ácidos nucleicos obtenidos a partir de células o tejidos lisados con el reactivo GeDI.
• El reactivo GeDI es una solución monofásica que no contiene disolventes orgánicos.
• El ADN purificado puede utilizarse para aplicaciones comunes como la PCR, clonación, RFLP, Southern blotting, etc.
• Contenido: Reactivo GeDI para el aislamiento de ADN total de varios tipos de muestras, tampón de resuspensión ResSol, columnas de centrifugación con membrana de sílice
• Cantidades de muestras aplicables: 50 mg de tejido animal, 50 a 200 mg de tejido vegetal, 107 células animales, bacterias o levaduras
• Rendimientos variables dependiendo del tipo de muestra: 5 a 50 µg para 10 mg de tejido animal, 10 a 100 µg para 500 mg de hoja, 4 a 7 µg para 106 células de mamíferos, 30 a 40 µg para 109 células bacterianas
• Disponible en versión 25 preparaciones y 100 preparaciones
• El reactivo GeDI también está disponible en versión stand alone

Reactivo de estabilización de ARN Fix RNA

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• Reactivo de estabilización y protección rápida del ARN en muestras frescas y no congeladas (tejidos, leucocitos, cultivos celulares o bacterianos)
• Mantiene los RNA hasta 7 días a temperatura ambiente y hasta 4 semanas a 4-8°C, la conservación por un peeriodo más largo se efectúa a -20°C o -80°C
• 10 volúmenes de reactivo por volumen de muestra, o 10 µl por mg de muestra

RNA Extracol

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• Reactivo de extracción de ARN total de muestras diversas (tejidos animales y humanos, plantas, células, levaduras y bacterias)
• Compuesto de fenol y tiocianato de guanidinio
• Protocolo simple, extracción de ARN en una hora
• Alto rendimiento
• Ajustable a la cantidad de material
• Requiere la adición de cloroformo, isopropanol, etanol y agua grado biología molecular

Endonucleasas de restricción

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La mayoría de las enzimas de restricción producidas por EURx funcionan en el tampón ONE BUFFER y pueden utilizarse para las digestiones dobles.
El tampón de reacción ONE BUFFER 10X se suministra con la enzima.

T4 ADN Ligasa

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• Cataliza la formación de un enlace fosfodiéster entre los extremos 5'-P y 3'-OH de nucleótidos de ADN o ARN de doble cadena
• Cataliza la unión de dos fragmentos de ADN de doble cadena en los extremos libres
• Catalizar la unión de fragmentos de ADN con extremos cohesivos complementarios
• Sella las roturas de una cadena en los dúplex de ADN, ARN o híbridos de ADN/ARN
• Adecuado para la clonación de fragmentos digeridos por las enzimas de restricción y para la vinculación de linkers o de adaptadores a ADN de extremo libre
• Disponible en formatos 20000 y 100000 unidades*
• *Unidad del extremo cohesivo - 200 UEC = 3 unidades Weiss

Fosfatasa alcalina (CIP)

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• Cataliza la hidrólisis de los monoésteres de fosfato
• Se utiliza para eliminar la extremidad 5'-P de ADN o ARN antes de su etiquetado en 5'
• Utilizado para retirar las extremidades 5'-P de los vectores lineales para evitar su recirculación "vacía" durante los procesos de clonación
• Compatible con la desfosforilación de proteínas
• Disponible en formatos 1000 y 5000 unidades

Polinucleótido Kinase T4 (PNK)

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• Cataliza la fosforilación del extremo 5'-OH de las moléculas de ADN o ARN de cadena simple y doble
• Cataliza la transferencia de fosfato-γ de la molécula de ATP al extremo 5'-OH del ácido nucleico
• Utilizado para fosforilar los enlazadores, adaptadores y fragmentos de ácido nucleico antes de la ligadura de los mismos
• Se utiliza para el etiquetado de 5' de los ácidos nucleicos antes de la secuenciación
• Contiene actividad secundaria 3'-fosfatasa
• Disponible en formatos 1000 y 5000 unidades

PfuPlus! DNA Polimerasa

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• Mezcla de ADN polimerasa Pfu (Pyrococcus furiosus) y un activador de polimerización termoestable
• Polimerasa recombinante ultrapura, termoestable y proofreading
• Formulación diseñada para sintetizar secuencias de ADN de hasta 20 kb
• Fidelidad más de 10 veces superior a una Taq estándar
• Recomendado para PCR de alta fidelidad, secuencias ricas en GC o con estructuras secundarias problemáticas, mutagénesis dirigida y clonación de extremo romo (blunt end)
• También se puede utilizar para la PCR clásica y la extensión de primers a alta temperatura
• Se suministra con un tampón de reacción de 10X
• Disponible en tamaños de 100, 500 y 2500 unidades
• OnPfuPlus! ADN polymérase: version hot start, estable a temperatura ambiente, activación en 10 min a 90 °C

Exo-BAP Mix

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• Mix utilizado para la limpieza de los productos de PCR por acción enzimática antes de la secuenciación o el análisis de SNP
• Permite la degradación de dNTP y primers no utilizados en la PCR y aún presentes en la mezcla de reacción
• Contiene fosfatasa alcalina bacteriana (BAP) sensible al calor y exonucleasa I en un tampón especialmente formulado
• Disponible en formatos 100 reacciones y 500 reacciones

Fosfatasa alcalina bacteriana (BAP) sensible al calor

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• Altamente adaptado a las técnicas de inmunodetección en el diagnóstico e inmunotinción de las proteínas y ácidos nucleicos transferidos a las membranas
• Cataliza la liberación de los grupos 5'-P y 3'-P de moléculas de ADN, ARN y nucleótidos
• Elimina las 5'-P de moléculas de ADN, ARN, rNTP y dNTP
• Utilizado para retirar las extremidades 5'-P de vectores lineales para evitar su recirculación "en vacío" durante los procesos de clonación
• Resistente a los cambios químicos y activo en una amplia variedad de tampones de reacción
• Inactivable por calor durante 5 minutos a 70 °C
• Compatible con la desfosforilación de proteínas
• Disponible en formatos 1000 y 5000 unidades

Exonucleasa I

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• Cataliza la eliminación de nucleótidos de un ADN de una sola cadena en sentido 3' -> 5'
• No degrada el ADN de doble cadena o el ARN
• Ideal para la degradación de primers de una sola cadena después de la PCR antes de la secuenciación de ADN o el análisis de SNP
• Usada para la degradación del ADN de una cadena en una preparación de ADN de doble cadena
• Activo en una amplia variedad de tampones de reacción
• Disponible en formatos 4000 y 20000 unidades

DNasa I (sin RNasa)

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• Endonucleasa que degrada de forma no específica el ADN de una o dos cadenas liberando di-, tri- y oligonucleótidos fosforilados en 5'
• Se utiliza para eliminar el ADN contaminante en preparaciones de ARN antes de las aplicaciones de RT-PCR y RT-qPCR
• También se utiliza para eliminar la matriz de ADN del medio de reacción después de la transcripción in vitro
• Disponible en formato 1000 y 5000 unidades

RNase A (sin DNasa)

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• Endoribonucleasa de pirimidina específica que degrada el ARN de una cadena
• Catalyse le clivage de la liaison phosphodiester entre une pyrimidine y le nucléotide suivant
• Se utiliza para la supresión de ARN en preparaciones de ADN
• Disponible en formato 10 y 50 mg

T7 Endonucleasa I

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• Enzima dependiente de la estructura que reconoce y escinde el ADN desparejado, el ADN heterodúplex, las estructuras de las ramas del ADN, las uniones Holliday y los nicks en el ADN
• La escisión ocurre en el primer, segundo o tercer enlace de fosfodiéster a 5' del desajuste.
• Enzima recombinante ultrapura

Aplicaciones posibles:
• Reconocimiento de los desajustes de ADN, especialmente en el contexto de la edición del genoma por el método Crispr
• Resolución de la unión de ADN de 4 ramas
• Detección de fisuras en el ADN heteroduplex y nicks en el ADN
• Disponible en formato 250 y 1250 unidades